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微量元素在人體內(nèi)含量雖然極微小，但具有強(qiáng)大的生物學(xué)作用。它們參與酶、激素維生素和核酸的代謝過(guò)程，其生理功能主要表現(xiàn)為協(xié)助輸送宏量元素；作為酶的組成成分或激活劑；在激素和維生素中起有效作用；影響核酸代謝等。在臨床醫(yī)學(xué)中，通過(guò)對(duì)血液中微量元素的含量進(jìn)行分析，可以判斷人體的健康狀況，對(duì)某些元素急性或慢性中毒進(jìn)行診斷，并以此為參考制定后續(xù)的治療方案。

電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）具有靈敏度高、檢出限低、動(dòng)態(tài)線性范圍寬、分析效率高、可多元素同時(shí)測(cè)定、譜線簡(jiǎn)單、干擾較少等優(yōu)勢(shì)。特別是在臨床醫(yī)學(xué)無(wú)機(jī)元素分析領(lǐng)域，這些優(yōu)勢(shì)更加顯著。目前國(guó)標(biāo)中存在一些ICP-MS測(cè)定血液中單元素的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，比如《血中鉛的測(cè)定-第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法》（GBZ/T 316.2-2018）和《血中鎘的測(cè)定-第2部分：電感耦合等離子體質(zhì)譜法》（GBZ/T 317.2-2018）等。但是有關(guān)ICP-MS同時(shí)測(cè)定血液中多種元素的標(biāo)準(zhǔn)則相對(duì)較少，比如《血液中鉻、鎘、砷和鉛的測(cè)定-電感耦合等離子體質(zhì)譜法》，且該標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定血液樣品分析前需要做消解前處理，不太適用于臨床血液樣品的快速分析。

鑒于臨床醫(yī)學(xué)中多元素同時(shí)快速測(cè)定的需求日益增長(zhǎng)，本文以譜三重四極桿(ICP-MS/MS)為例，提供一種同時(shí)測(cè)定血液中Ca、Mg、As、Cu、Fe、Mn、Pb、Se、Zn共9種元素的方案，該方法無(wú)需消解，可將血液樣品稀釋處理后直接進(jìn)樣分析，快速便捷。

實(shí)驗(yàn)部分

儀器

表1 電感耦合等離子質(zhì)譜儀

表2 電感耦合等離子質(zhì)譜儀檢測(cè)參數(shù)

試劑及標(biāo)準(zhǔn)品

      試劑：Triton X-100、優(yōu)級(jí)純硝酸、優(yōu)級(jí)純異丙醇、超純水（電阻率≥18.2 MΩ?cm，25℃）

      標(biāo)準(zhǔn)溶液：多元素混標(biāo)溶液（1000 μg/mL，國(guó)家有色金屬研究院）、多元素內(nèi)標(biāo)溶液。

樣品處理

      （1）配制血液樣品稀釋劑：0.5%硝酸+0.01%曲拉通+2%異丙醇，取5 mL硝酸、0.1 mL曲拉通和20 mL異丙醇，用超純水稀釋混勻定容到1000 mL。

      （2）血液樣本前處理：取0.5 mL血液用稀釋劑稀釋至10 mL，上下?lián)u晃均勻后渦旋10分鐘，5000 r/min離心10分鐘，取上清液進(jìn)樣測(cè)試。（注意：血液取樣前須盡量搖晃均勻）

結(jié)果和討論

方法精密度

       為考察分析方法的穩(wěn)定性，以制備的7個(gè)實(shí)際血液樣品進(jìn)樣，進(jìn)行方法精密度測(cè)試，各元素精密度測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表5，各元素的測(cè)定值的RSD值均優(yōu)于2.51%，表明該方法精密度良好。

表5方法精密度（μg/L）

實(shí)際樣品測(cè)試

       部分血液樣品中元素含量結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 血液樣品測(cè)定濃度（單位：μg/L）

結(jié)論

       方法采用ICP-MS/MS電感耦合等離子質(zhì)譜儀對(duì)血液樣本中的9種元素進(jìn)行了分析。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，所建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性系數(shù)均大于0.999，樣品平行性較好；對(duì)于各元素采取合適的加標(biāo)濃度進(jìn)行加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，加標(biāo)回收率都處在88.41%~112.90%之間。上述測(cè)試結(jié)果證明，對(duì)于血液這種具有復(fù)雜基體的生物樣品，在開(kāi)啟碰撞模式的情況下，碰撞模式能有效消除基體干擾，保持較高的靈敏度、穩(wěn)定性、準(zhǔn)確度和精密度。綜上，使用ICP-MS/MS通過(guò)此方案可以快速精準(zhǔn)地完成血液中多種元素的同時(shí)測(cè)定。

附錄

儀器配置及試劑相關(guān)信息

• 三重四極桿ICP-MS

  檢測(cè)儀器在線詢價(jià)